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• 一、青霉素發(fā)酵的方法和步驟是什么？
• 二、超聲波逆流提取機(jī)組是否能提取甜葉菊。
• 三、哈爾濱樂(lè)泰藥業(yè)旗下有多少個(gè)分公司
• 四、三級(jí)逆流混合澄清萃取設(shè)備流程原理

一、青霉素發(fā)酵的方法和步驟是什么？

什么叫生物制藥呢？生物制藥的藥物來(lái)源是什么呢？
生物藥物是指運(yùn)用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細(xì)胞、體液等，綜合利用微生物學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等科學(xué)的原理和方法制造的一類用于預(yù)防、治療和診斷的制品。生物藥物原料以天然的生物材料為主，包括微生物、人體、動(dòng)物、植物、海洋生物等。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，有目的人工制得的生物原料成為當(dāng)前生物制藥原料的主要來(lái)源。如用免疫法制得的動(dòng)物原料、改變基因結(jié)構(gòu)制得的微生物或其它細(xì)胞原料等。生物藥物的特點(diǎn)是藥理活性高、毒副作用小，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。生物藥物主要有蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂類等。這些物質(zhì)的組成單元為氨基酸、核苷酸、單糖、脂肪酸等，對(duì)人體不僅無(wú)害而且還是重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。生物藥物的陣營(yíng)很龐大，發(fā)展也很快。
目前全世界的醫(yī)藥品已有一半是生物合成的，特別是合成分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜的藥物時(shí)，它不僅比化學(xué)合成法簡(jiǎn)便，而且有更高的經(jīng)濟(jì)效益。
半個(gè)世紀(jì)以來(lái)微生物轉(zhuǎn)化在藥物研制中一系列突破性的應(yīng)用給醫(yī)藥工業(yè)創(chuàng)造了巨大的醫(yī)療價(jià)值和經(jīng)濟(jì)效益。微生物制藥工業(yè)生產(chǎn)的特點(diǎn)是利用某種微生物以“純種狀態(tài)”，也就是不僅“種子”要優(yōu)而且只能是一種，如其它菌種進(jìn)來(lái)即為雜菌。對(duì)固定產(chǎn)品來(lái)說(shuō)，一定按工藝有它最合適的“飯”—培養(yǎng)基，來(lái)供它生長(zhǎng)。培養(yǎng)基的成分不能隨意更改，一個(gè)菌種在同樣的發(fā)酵培養(yǎng)基中，因?yàn)橹簧倭嘶蚨嗔四硞€(gè)成分，發(fā)酵的成品就完全不同。如金色鏈霉菌在含氯的培養(yǎng)基中可形成金霉素，而在沒(méi)有氯化物或在培養(yǎng)基中加入抑制生成氯化的物質(zhì)，就產(chǎn)生四環(huán)素。藥物生產(chǎn)菌投入發(fā)酵罐生產(chǎn)，必須經(jīng)過(guò)種子的擴(kuò)大制備。從保存的菌種斜面移接到搖瓶培養(yǎng)，長(zhǎng)好的搖瓶種子接入培養(yǎng)量大的種子罐中，生長(zhǎng)好后可接入發(fā)酵罐中培養(yǎng)。不同的發(fā)酵規(guī)模亦有不同的發(fā)酵罐，如10噸、30噸、50噸、100噸，甚至更大的罐。這如同我們作飯時(shí)用的大小不同的鍋。
我們吃的維生素、紅霉素、潔霉素等，注射用的青霉素、鏈霉素、慶大霉素等就是用不同微生物發(fā)酵制得的。醫(yī)藥上已應(yīng)用的抗生素絕大多數(shù)來(lái)自微生物，每個(gè)產(chǎn)品都有嚴(yán)格的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)。預(yù)測(cè)生物制藥的研究進(jìn)展，它將廣泛用于治療癌癥、艾滋病、冠心病、貧血、發(fā)育不良、糖尿病等多種疾病。提示：與發(fā)酵有關(guān)的企業(yè)包括：

制藥業(yè)：抗生素、氨基酸、維生素的生產(chǎn)廠家；

食品業(yè)：醋、醬油、醬、酒等的生產(chǎn)廠家；

輕工業(yè)：檸檬酸、乳酸、味精、肌苷酸、干酵母、色素、黃原膠、甘油等的生產(chǎn)廠家；

化工業(yè)：酒精、丙酮、丁醇、衣康酸、丙烯酰胺和聚丙烯酰胺等的生產(chǎn)廠家；

飼料業(yè)：飼料添加劑的生產(chǎn)廠家；

農(nóng)藥業(yè)：農(nóng)用抗生素、微生物肥料、微生物農(nóng)藥等的生產(chǎn)廠家。

五、參考資料

1.利用微生物發(fā)酵可以生產(chǎn)哪些產(chǎn)品？

利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)的產(chǎn)品包括：

酒類，如果酒（葡萄酒等）、米酒、白酒等；

有機(jī)溶劑，如乙醇、丙酮、丁醇、甘油；

有機(jī)酸，如醋酸、乳酸、葡萄糖酸、檸檬酸、酒石酸、衣康酸、長(zhǎng)鏈二元酸（以十三到十八碳的直鏈烷烴為原料的發(fā)酵產(chǎn)品）；

氨基酸，如谷氨酸（單谷氨酸鈉又稱味精）、賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、精氨酸、絲氨酸、丙氨酸、酪氨酸、蘇氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸等；

核苷酸及其類似物，如鳥(niǎo)嘌呤核苷酸（5’-GMP）、肌苷酸（5’-IMP）、腺嘌呤核苷酸（5’-AMP）、黃嘌呤核苷酸（5’-XMP）等；

抗生素，包括疾病治療的藥用抗生素，農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)用于防病抗病的抗生素，如青霉素、頭孢霉素、鏈霉素、四環(huán)素、土霉素、紅霉素、稻瘟素、井崗霉素、春日霉素等等；

多糖，如黃原膠、普魯蘭等；

酶，如堿性蛋白酶（洗滌劑）、中性蛋白酶（洗滌劑等）、脂肪酶（洗滌劑）、α-淀粉酶（淀粉水解）、葡萄糖淀粉酶（葡萄糖生產(chǎn)）、葡萄糖異構(gòu)酶（高果糖糖漿生產(chǎn)）、纖維素酶（纖維素水解、紡織品加工）、果膠酶（食品、水果加工等）、凝乳酶（奶酪制造）、青霉素酰化酶（青霉素母核生產(chǎn)）、天冬氨酸酶（L 天冬氨酸制造）、延胡索酸酶（L 蘋(píng)果酸制造）、葡萄糖氧化酶（檢驗(yàn)葡萄糖）、乳酸脫氫酶（臨床檢驗(yàn)）、鏈激酶（治療血栓）等等，目前世界上有100多種酶用微生物發(fā)酵生產(chǎn)，應(yīng)用于不同領(lǐng)域。

2.如何選育菌種？

為了獲得適合大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)所需的優(yōu)良生產(chǎn)菌種，一般首先是從自然界分離篩選具有產(chǎn)生目標(biāo)產(chǎn)物能力的菌種，但這樣獲得的菌種的生產(chǎn)能力往往較低，生理生化特性不一定能滿足生產(chǎn)要求，還需要進(jìn)行大量的誘變選育，進(jìn)一步提高其生產(chǎn)能力，改善性能；也可以對(duì)現(xiàn)有的生產(chǎn)菌種進(jìn)行改造，即經(jīng)誘變育種，選育出符合實(shí)際生產(chǎn)需要的菌株。

自然界中微生物資源異常豐富，土壤、水、空氣、腐敗的動(dòng)植物殘骸，都是微生物的主要集居和生長(zhǎng)繁衍的場(chǎng)所。其種類之多，至今仍然是一個(gè)難于估測(cè)的未知數(shù)。以其集居環(huán)境（包括特殊和極端環(huán)境）、營(yíng)養(yǎng)類型、生存方式、生理類型、代謝途徑、合成能力等比較，均居生物界之冠。因此，微生物資源的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用是當(dāng)今世界矚目的重大課題。

菌種的分離，不僅是把混雜的各類微生物有效地分開(kāi)，得到純種，更重要的是依著生產(chǎn)實(shí)際的要求，有的放矢、快速、準(zhǔn)確地將能產(chǎn)生所需產(chǎn)物，或具有某種生化反應(yīng)性能的菌種，從大量的微生物中挑選出來(lái)。有時(shí)是設(shè)計(jì)一種在分離階段便能識(shí)別所需菌種的方法，更多的是利用特定的方法分離，獲得所需菌種后，再進(jìn)行識(shí)別。為了使獲得的菌種能滿足工業(yè)生產(chǎn)的需要，須考慮各種性能指標(biāo)。因此，菌種分離和篩選的方法和策略就十分重要。

一般的菌種分離純化和篩選步驟可分為采樣、增殖與分離、發(fā)酵與性能測(cè)定等幾個(gè)步驟。步驟和方法如下圖所示：

3.發(fā)酵培養(yǎng)基如何配制？

首先需了解微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

（1）微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)滿足微生物的生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理活動(dòng)的需要。它們的作用可概括為形成結(jié)構(gòu)（參與細(xì)胞組成）、提供能量和調(diào)節(jié)作用（構(gòu)成酶的活性和物質(zhì)運(yùn)輸系統(tǒng)）。

微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有六大類要素，即水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子和能源。

① 水

水是微生物的重要組成部分，在代謝中占有重要地位。水在細(xì)胞中有兩種存在形式：結(jié)合水和游離水。結(jié)合水與溶質(zhì)或其他分子結(jié)合在一起，很難加以利用。游離水（或稱為非結(jié)合水）則可以被微生物利用。

② 碳源

碳在細(xì)胞的干物質(zhì)中約占50%，所以微生物對(duì)碳的需求最大。凡是作為微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)或代謝產(chǎn)物中碳架來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，稱為碳源。

作為微生物營(yíng)養(yǎng)的碳源物質(zhì)種類很多，從簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物（CO2、碳酸鹽）到復(fù)雜的有機(jī)含碳化合物（糖、糖的衍生物、脂類、醇類、有機(jī)酸、芳香化合物及各種含碳化合物等）。但不同微生物利用碳源的能力不同，假單孢菌屬可利用90種以上的碳源，甲烷氧化菌僅利用兩種有機(jī)物：甲烷和甲醇，某些纖維素分解菌只能利用纖維素。

大多數(shù)微生物是異養(yǎng)型，以有機(jī)化合物為碳源。能夠利用的碳源種類很多，其中糖類是最好的碳源。

異養(yǎng)微生物將碳源在體內(nèi)經(jīng)一系列復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)，最終用于構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)，或?yàn)闄C(jī)體提供生理活動(dòng)所需的能量。所以，碳源往往也是能源物質(zhì)。

自養(yǎng)菌以CO2、碳酸鹽為唯一或主要的碳源。CO2是被徹底氧化的物質(zhì)，其轉(zhuǎn)化成細(xì)胞成分是一個(gè)還原過(guò)程。因此，這類微生物同時(shí)需要從光或其他無(wú)機(jī)物氧化獲得能量。這類微生物的碳源和能源分別屬于不同物質(zhì)。

③ 氮源

凡是構(gòu)成微生物細(xì)胞的物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中氮元素來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，稱為氮源。細(xì)胞干物質(zhì)中氮的含量?jī)H次于碳和氧。氮是組成核酸和蛋白質(zhì)的重要元素，氮對(duì)微生物的生長(zhǎng)發(fā)育有著重要作用。從分子態(tài)的N2到復(fù)雜的含氮化合物都能夠被不同微生物所利用，而不同類型的微生物能夠利用的氮源差異較大。

固氮微生物能利用分子態(tài)N2合成自己需要的氨基酸和蛋白質(zhì)，也能利用無(wú)機(jī)氮和有機(jī)氮化物，但在這種情況下，它們便失去了固氮能力。此外，有些光合細(xì)菌、藍(lán)藻和真菌也有固氮作用。

許多腐生細(xì)菌和動(dòng)植物的病原菌不能固氮，一般利用銨鹽或其他含氮鹽作氮源。硝酸鹽必須先還原為NH+4后，才能用于生物合成。以無(wú)機(jī)氮化物為唯一氮源的微生物都能利用銨鹽，但它們并不都能利用硝酸鹽。

有機(jī)氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米漿等，工業(yè)上能夠用黃豆餅粉、花生餅粉和魚(yú)粉等作為氮源。有機(jī)氮源中的氮往往是蛋白質(zhì)或其降解產(chǎn)物。

氮源一般只提供合成細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞中其他結(jié)構(gòu)的原料，不作為能源。只有少數(shù)細(xì)菌，如硝化細(xì)菌利用銨鹽、硝酸鹽作氮源和能源。

④ 無(wú)機(jī)鹽

無(wú)機(jī)鹽也是微生物生長(zhǎng)所不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。其主要功能是：① 構(gòu)成細(xì)胞的組成成分；② 作為酶的組成成分；③ 維持酶的活性；④ 調(diào)節(jié)細(xì)胞的滲透壓、氫離子濃度和氧化還原電位；⑤ 作為某些自氧菌的能源。

磷、硫、鉀、鈉、鈣、鎂等鹽參與細(xì)胞結(jié)構(gòu)組成，并與能量轉(zhuǎn)移、細(xì)胞透性調(diào)節(jié)功能有關(guān)。微生物對(duì)它們的需求量較大（10-4～10-3 mol/L），稱為“宏量元素”。沒(méi)有它們，微生物就無(wú)法生長(zhǎng)。鐵、錳、銅、鈷、鋅、鉬等鹽一般是酶的輔因子，需求量不大（10-8～10-6 mol/L），所以，稱為“微量元素”。不同微生物對(duì)以上各種元素的需求量各不相同。鐵元素介于宏量和微量元素之間。

在配制培養(yǎng)基時(shí)，可通過(guò)添加有關(guān)化學(xué)試劑來(lái)補(bǔ)充宏量元素，其中首選是K2HPO4和MgSO4，它們可提供需要量很大的元素：K、P、S和Mg。微量元素在一些化學(xué)試劑、天然水和天然培養(yǎng)基組分中都以雜質(zhì)等狀態(tài)存在，在玻璃器皿等實(shí)驗(yàn)用品上也有少量存在，所以，不必另行加入。

⑤ 生長(zhǎng)因子

一些異養(yǎng)型微生物在一般碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)不能生長(zhǎng)或生長(zhǎng)較差。當(dāng)在培養(yǎng)基中加入某些組織（或細(xì)胞）提取液時(shí)，這些微生物就生長(zhǎng)良好，說(shuō)明這些組織或細(xì)胞中含有這些微生物生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)因子，這些因子稱為生長(zhǎng)因子。

生長(zhǎng)因子可定義為：某些微生物本身不能從普通的碳源、氮源合成，需要額外少量加入才能滿足需要的有機(jī)物質(zhì)，包括氨基酸、維生素、嘌呤、嘧啶及其衍生物，有時(shí)也包括一些脂肪酸及其他膜成分%A

二、超聲波逆流提取機(jī)組是否能提取甜葉菊。

理論上可以提取，但實(shí)際操作只在國(guó)外一些機(jī)構(gòu)發(fā)現(xiàn)使用，效果如何還不是太清楚。



三、哈爾濱樂(lè)泰藥業(yè)旗下有多少個(gè)分公司

哈爾濱樂(lè)泰藥業(yè)有限公司創(chuàng)建于1996年，被黑龍江省科技廳授予“高新技術(shù)企業(yè)”稱號(hào)，并全面通過(guò)國(guó)家GMP認(rèn)證，是國(guó)內(nèi)集現(xiàn)代化中藥、化藥、保健藥、臨床藥、醫(yī)療器械等研究、開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)，五位一體的高科技現(xiàn)代化制藥企業(yè)。從2003年開(kāi)始，連續(xù)11年成為呼蘭區(qū)納稅大戶，是哈爾濱市“民營(yíng)企業(yè)納稅50強(qiáng)”之一。
企業(yè)位于哈爾濱市利民經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)北京路中段，占地面積4萬(wàn)平方米。總建筑面積達(dá)48000平方米，主要廠房建筑面積23000平方米。2012年成為北京路地標(biāo)性建筑的17層信息化綜合培訓(xùn)辦公大樓正式投入使用，建筑面積達(dá)17000平方米。
企業(yè)生產(chǎn)一線有5個(gè)車(chē)間，8條生產(chǎn)線。擁有以國(guó)內(nèi)外先進(jìn)制藥企業(yè)為樣板，具有國(guó)內(nèi)外先進(jìn)一流水平的精良制藥設(shè)備197臺(tái)（套），保證生產(chǎn)高質(zhì)量產(chǎn)品的需要。配備精密分析、檢驗(yàn)儀器46臺(tái)（套），能按藥典規(guī)定完成各項(xiàng)檢測(cè)工作。保證產(chǎn)品質(zhì)量控制和新產(chǎn)品研發(fā)處于行業(yè)內(nèi)的高水平。
企業(yè)的領(lǐng)導(dǎo)層由精通行業(yè)規(guī)律的醫(yī)藥科技人才、管理與銷(xiāo)售人才組成，認(rèn)真貫徹“重人才、嚴(yán)管理、深開(kāi)發(fā)、創(chuàng)效益”的治企方針，現(xiàn)有員工2800余人，在公司內(nèi)從事生產(chǎn)、管理的專業(yè)技術(shù)人才占總部人員總數(shù)的33%，藥學(xué)專業(yè)技術(shù)人才占總部人員總數(shù)的25%。其中自主培養(yǎng)中高層骨干人員達(dá)到62.5%以上，有11%的員工在企業(yè)連續(xù)工作5年以上。完善的用人機(jī)制，人性化的管理思路穩(wěn)定了高素質(zhì)的人才隊(duì)伍，保證了企業(yè)在創(chuàng)新中得以迅速發(fā)展。
企業(yè)擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)等無(wú)形資產(chǎn)不斷增值。企業(yè)生產(chǎn)的自主研發(fā)產(chǎn)品包括藥品、醫(yī)療器械、消毒產(chǎn)品、保健食品、化妝品、食品等六大類，16種劑型近百余個(gè)產(chǎn)品。產(chǎn)品系列包括“亮甲”系列、“康角丫”系列、“甘樂(lè)保”系列、“香角丫”、“升甲”系列等十余個(gè)系列。
“香角丫”、“康角丫”品牌被認(rèn)定為黑龍江省著名商標(biāo)，“亮甲”品牌已經(jīng)榮獲“中國(guó)馳名商標(biāo)”、 “黑龍江省著名商標(biāo)”，“哈爾濱著名商標(biāo)”，榮獲了中國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)部頒發(fā)的“中國(guó)外用藥十大品牌”及“中國(guó)亮甲市場(chǎng)消費(fèi)者首選品牌”、黑龍江省“高新技術(shù)產(chǎn)品”等稱號(hào)。此外，膽利舒膠囊獲中國(guó)商業(yè)聯(lián)合會(huì)頒發(fā)的“科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)”和“國(guó)家產(chǎn)品發(fā)明專利”；亮甲、蛭丹絡(luò)活膠囊、膽利舒膠囊榮獲黑龍江省“高新技術(shù)產(chǎn)品”稱號(hào)，同時(shí)獲得黑龍江省“優(yōu)秀新產(chǎn)品”獎(jiǎng)；“香角丫”系列產(chǎn)品被中國(guó)市場(chǎng)監(jiān)測(cè)中心、中國(guó)市場(chǎng)研究中心評(píng)為“中國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)品治腳氣十大用戶滿意產(chǎn)品”。
2000年，獨(dú)立研發(fā)出高科技“亮甲”品牌系列產(chǎn)品，獨(dú)創(chuàng)了治愈灰指甲的“新三段療法”，解決灰指甲治愈難、治愈慢的世界性難題。十四年來(lái)，“亮甲”產(chǎn)品對(duì)灰指甲的治愈率達(dá)到85%以上，目前，“亮甲” 全國(guó)同行排名第一，成為國(guó)內(nèi)治療灰指甲的第一品牌。
哈爾濱樂(lè)泰藥業(yè)已經(jīng)形成具有“樂(lè)泰特色”的管理經(jīng)營(yíng)模式及企業(yè)文化，靈活運(yùn)用到企業(yè)管理、生產(chǎn)管理、市場(chǎng)管理、研發(fā)管理等各個(gè)領(lǐng)域，用認(rèn)真嚴(yán)謹(jǐn)、求實(shí)創(chuàng)新的工作作風(fēng)，以“興企、富家、康民、報(bào)國(guó)”為使命，面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)，必將為社會(huì)主義物質(zhì)文明、精神文明建設(shè)，為中國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展壯大，為成就人類健康、美麗事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)

四、三級(jí)逆流混合澄清萃取設(shè)備流程原理

三級(jí)逆流混合澄清萃取設(shè)備流程原理如下：
1、利用螺旋柱在行星運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的多維離心力場(chǎng)。
2、使互不相溶的兩相不斷混合，同時(shí)保留其中的一相（固定相），利用恒流泵連續(xù)輸入另一相（流動(dòng)相）。
3、隨流動(dòng)相進(jìn)入螺旋柱的溶質(zhì)在兩相之間反復(fù)分配，按分配系數(shù)的次序，被依次萃取分離出。
4、在流動(dòng)相中分配比例大的先被洗脫，反之，在固定相中分配比例大的后被洗脫，從而實(shí)現(xiàn)分離。

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